LEC-1倉鼠卵巢細胞

一．細胞簡介：
細胞名稱：lec-1倉鼠卵巢細胞（種屬鑒定）
平臺編碼：zl-056981
lec1(原先叫做pro-5wgar13c,atcc)是從脯氨酸缺陷型的cho克隆pro-5中挑選出來的能抗麥芽凝集素的突變株。lec1缺乏稱作glcnac-t1的糖基轉移酶，從而n-連接碳水化合物被阻斷在man5glcnac2asn中間體。對于研究n-連接糖基化改變對內源糖蛋白或病毒感染、以克隆dna轉染產生的糖蛋白的功能和區隔化的影響，這些細胞十分有用。
細胞特性
1）來源：倉鼠卵巢
2）形態：上皮細胞樣，松散貼壁
3）含量：>1x106細胞數
4）規格：t25瓶或者1ml凍存管包裝
5）用途：僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1ml凍存管包裝干冰運輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。
（2）t25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將t25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。
2）請在4或5x顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為時收到時細胞狀態的依據。
3）半貼細胞和貼壁不牢（懸浮）細胞：t25瓶置于37℃培養箱中約2-3h，顯微鏡下觀察細胞的情況，若細胞密度在60%以下，客戶需收集t25瓶中的懸浮細胞離心后用完全培養基重懸后打回到原培養瓶中繼續培養，若細胞生長70%-90%對細胞進行傳代，傳代時需要收集培養基中懸浮的細胞離心后回收。
4）備注：運輸用的培養基（灌液培養基）不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。收到細胞后第一次傳代建議t25培養瓶1：2傳代。
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備mema培養基;優質胎牛血清，10%；雙抗，1%。
細胞培養過程中，貼壁不牢，松散貼壁，容易脫落。
2）培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%dmso，現用現配。
二．細胞處理：
1）凍存細胞的復蘇：
將含有1ml細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6ml完全培養基的離心管中混合均勻。在1000rpm條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達70%-90%，即可進行傳代培養。
該細胞為輕微貼壁和懸浮培養細胞，傳代可以參考以下方法：
1.收集：將培養瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的pbs潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢pbs潤洗后細胞會脫落所以pbs也要回收到離心管中。
2.加入0.25％（w/v）胰蛋白酶-0.53mmedta于培養瓶中（t25瓶1-2ml，t75瓶2-3ml）置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%fbs的培養基來終止消化。
3.將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2ml培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新t25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。
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提供模式菌種，科研菌種，普通菌種等菌種資源，有證質控樣品等微生物標準品，芽孢懸液。常用藥典菌種如：大腸埃希氏菌cmcc（b）44102、黑曲霉cmcc（f）98003,白色念珠菌cmcc(f)98001,枯草芽孢桿菌cmcc（b）63501,銅綠假單胞菌cmcc（b）10104,生孢梭菌cmcc（b）64941;常用益生菌：長雙歧桿菌（bifidobacteriumlongum）,嗜熱鏈球菌（streptococcusthermophilus），鼠李糖乳桿菌（lactobacillusrhamnosus），類干酪乳桿菌（lactobacillusparacasei），干酪乳桿菌（lactobacilluscasei）；常用真菌：松口蘑tricholomamatsutake，灰葡萄孢bio-81601cfcc50437botrytiscinerea；靈芝，香菇，茯苓等
原代細胞和細胞系產品：
現取不同組織現分：不同來源人/鼠/兔/豬等不同組織如肺、氣管、支氣管、甲狀腺、胰腺、垂體、腎上腺、扁桃體、胸腺、腎、膀胱、輸尿管、前列腺、心臟、血管。常用原代細胞有：氣管上皮細胞；前列腺上皮細胞；膀胱上皮細胞；輸尿管上皮細胞；腎足細胞；內皮祖細胞；輸卵管上皮細胞；乳腺上皮細胞
公司提供細胞系人源做過str鑒定，其他做過種屬鑒定，確保產品無誤后方可提供客戶，形式凍存或復蘇節省客戶時間；確保實驗順利。常用細胞系有：wb-f344細胞；rg2[d74]細胞；nrk細胞；a7r5細胞；l6細胞；umnsah/df-1細胞；mdbk(nbl-1)細胞；mdbk細胞；ccc-smc-1細胞；ptk1(nbl-3)細胞；mv1lu細胞；mv.1.lu(nbl-7)細胞；f81細胞；crfk細胞；mltc-1細胞；ms1細胞；c3h/10t1/2,clone8細胞；gl261細胞；p3x63ag8.653細胞；hcc38細胞；zr-75-30細胞；sk-lu-1細胞；nci-h2087細胞；sk-n-mc細胞；hs895.t細胞