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磁珠分選純化試劑盒推廣應(yīng)用

基于 spri(solid phase reversible immobilization ) 技術(shù),在磁珠法反應(yīng)體系中,核酸分子(dna & rna)會(huì)由線性壓縮成球狀, dna 在一定濃度的 peg 存在條件下,nacl 或 mgcl2 促進(jìn)條件下,dna 分子構(gòu)象會(huì)發(fā)生急劇變化,會(huì)暴露出磷酸骨架上大量的帶負(fù)電荷的磷酸基團(tuán),與表面帶負(fù)電荷的羧基-cooh 磁珠結(jié)合。目前認(rèn)為這種負(fù)負(fù)電荷間的作用是由于帶正電荷的鹽離子的作用(如 na+)。帶負(fù)電磷酸基團(tuán)借由解離的鹽離子(如 na+)與羧基形成「陰離子-陽離子-陰離子」的鹽橋結(jié)構(gòu),使 dna 被特異性吸附到羧基磁珠表面。而當(dāng)反應(yīng)緩沖液被棄除后,加入水性分子,會(huì)快速充分水化核酸分子,解除三者之間的離子相互作用,使吸附到磁珠上的核酸分子被純化出來。利用磁珠的磁性,可通過外加磁場進(jìn)行收集。
受益于高通量測序技術(shù)的發(fā)展,磁珠也憑借其高通量,適用于自動(dòng)化的特點(diǎn)備受推崇,廣泛用于 ngs 文庫構(gòu)建中的 dna 提取純化及雙輪分選(片篩)。
dna 提取純化的目的在于去除不想要的片段、回收需要的片段。由于磁珠**吸附大片段,因而可通過一定比例的磁珠吸附特定大小以上的片段,丟棄上清(去除非目標(biāo)片段)后將磁珠吸附的 dna 洗脫回收。
dna 雙輪分選(片篩)目的在于從片段中選擇特定區(qū)域的 dna 片段大小。由于磁珠**吸附大片段,因而需通過兩輪磁珠操作進(jìn)行分選。
兔牙生物科技研發(fā)的 bunnymagtm 磁珠分選純化試劑盒中的磁珠,與市面上大部分的磁珠類似,
磁珠結(jié)構(gòu)(分為 3 層):
? 較內(nèi)層的**是 polystyrene,ps
? *二層包裹磁性物質(zhì)——四氧化三鐵(fe3o4)
? 較外層表面是羧基(-cooh)修飾的高分子材料
磁珠體系主要包括磁珠、聚乙二醇(peg)、鹽離子(nacl)
兔牙科技 bunnymagtm 磁珠的優(yōu)勢:
(1)樣本需求量低:微量的材料即可提到高濃度的核酸;
(2)操作簡單快速:整個(gè)操作流程基本分為五步(裂解、結(jié)合、洗滌、干燥、洗脫),全程*離心操作,大多可在 30~60 分鐘內(nèi)完成;
(3)質(zhì)量穩(wěn)定可靠:游離的磁珠與核酸的結(jié)合量較大,特異性的結(jié)合使得核酸純度較高,且可通過控制磁珠表面基團(tuán)來調(diào)節(jié)核酸回收量;
(4)全自動(dòng)化操作:采用核酸提取儀可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化、高通量操作,可實(shí)現(xiàn)幾十甚至幾百個(gè)樣品的提取;
(5)安全無毒無害:試劑不含酚等有毒化學(xué)試劑,完全符合現(xiàn)代化環(huán)保理念。
南京兔牙生物科技有限公司專注于去人源宿主試劑盒,游離dna保存管,游離dna提取,ffpe提取,qubit定量,病原微生物提取等

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