友名生物技術-堿性*酶

所有合成cdna條鏈的方法都要用依賴于rna的dna聚合酶(反轉錄酶)來催化反應，主要有兩個關鍵因素，一個是mrna模板，另一個是反轉錄酶 。商品化反轉錄酶有從禽類成髓細胞瘤病毒純化到的禽類成髓細胞病毒（amv）逆轉錄酶和從表達化的moloney鼠病毒反轉錄酶*的大腸中分離到的鼠病毒（mlv）反轉錄酶。amv反轉錄酶包括2個具有若干種酶活性的多肽亞基，這些活性包括依賴于rna的dna合成，依賴于dna的dna合成以及對dna-rna雜交體的rna部分進行內切降解（rna酶h活性）。mlv反轉錄酶只有單個多肽亞基，兼備依賴于rna和依賴于dna的dna合成活性，但降解dna—rna雜交體中的rna的能力較弱。且其熱穩定性較amv反轉錄酶差。mlv反轉錄酶能合成較長的edna（如大于2～3kb）。amv反轉錄酶和mi。v反轉錄酶利用rna模板合成cdna時的適ph、適鹽濃度和適溫度各不相同．所以合成鏈時相應調整條件是非常重要的。
t4 rna ligase主要用于rna和rna之間的連接，連接時需要5*基團和3羥基的存在。不僅可以進行rna分子間的連接，也可以進行rna分子(*短8個堿基)的環化連接。
t4 rna ligase可以用于rna和單核苷酸之間的連接，堿性*酶，單核苷酸必須為5和3均*化的形式，此時常用于rna的3末端標記。
t4 rna ligase也可以用于dna和rna之間的連接。當dna提供5*基團，rna提供3羥基時，連接效率較高；當dna提供3羥基，rna提供5*基團時，連接效率非常低。
t4 rna ligase也可以用于dna和dna之間的連接，但連接效率非常低。主要用于dna的環化連接，例如5 race中的cdna環化。dna和dna之間的連接盡管可以進行，但比較困難。
堿性*酶
*在懷孕，以及骨骼成長中遭受某種類型損傷后會將堿性*酶釋放進血流。堿性*酶是一種由肝1臟產生的蛋白質并可以在所有*器1官中發現它。在兒童和青少年的骨骼成長過程中，骨頭中的*酶數量相對較高。醫生能通過血檢了解堿性*酶，如果水平過高就說明存在一些健康問題。然而，堿性*酶只是幫助醫生找出潛在原因的其中一個指數。
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